动物细胞贴壁培养的方法有哪些

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/26 17:30:17

动物细胞贴壁培养的方法有哪些
动物细胞贴壁培养的方法有哪些

动物细胞贴壁培养的方法有哪些
原代培养有两种
组织块培养法：
1）将上述剪好的小块放入15ml离心管中用10ml的Hanks洗液强有力的反复吹打,1000转离心1分钟,弃去上清,重复一次.
2）用习惯将组织块放入25cm2 培养瓶中,竖起培养瓶,加入1-2ml培养液,培养箱中将培养瓶底朝上,放置2-4小时,小心将培养瓶方正,继续培养.
3）培养3-4小时后缓慢取出培养瓶,加5ml培养液,继续培养.
4）三天后小心取出观察,搜集漂浮组织块,置入离心管中,400转离心3分钟,弃去三分之二上清,补加5ml培养液,移入25cm2 培养瓶中继续培养.
消化培养法：
1）将上述剪好的小块放入15ml离心管中,加入5-10ml的IV胶原酶消化液,放入37℃水浴中不断震荡,联系观察一小时,直至组织块弥散开为止,每隔30分钟收集消化液.
2）400转离心4分钟,收集细胞沉淀,用Hanks洗液冲洗,并重复一次.
3）将收集的细胞沉淀,用培养液重悬,置于4°冰箱,直至消化全部结束.
4）将细胞悬液通过250目不锈钢钢筛,将滤液置于25cm2 培养瓶中,放入培养箱培养.

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