重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 02:52:16
重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来

重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来
重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一
PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来的.

重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来
大小不一是差多少?你PCR扩增出来的时候是多长?双酶切出来是多长?
你最好先把重组质粒单酶切看一下,有可能是你的质粒不纯,混了别的质粒;另外,用软件再检查一下你的质粒序列,不要别的位置上有双酶切可以切开的位点;还有,你酶切时间多长?可以过夜切一下试试看
你转化质粒到菌里去之后,有没有用PCR的方法去做菌落或者质粒的鉴定?你1KB的带,酶切鉴定出来2KB,说明质粒肯定不对的嘛,或者还有一个可能你把MARK长度记错了

重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? 转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行? 问个重组质粒的电泳图和重组质粒pcr产物的电泳图的基本问题很小白,我不懂重组质粒的电泳图是如何验证重组质粒成功构建了呢,因为跑出来的大小与重组质粒应有的大小一致?还有不明白重 PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先是质粒提取后琼脂糖凝胶电泳,得到下面图谱,团长,这个图怎么分啊PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先后经过氨苄 重组DNA分子为什么不用PCR扩增而要导入宿主细胞进行扩增 重组质粒鉴定pcr没条带,酶切有条带我有两种重组质粒,两个基因片段大小一样,我的重组质粒都与空质粒大小相差300左右,但是用0.9%的胶140v电泳,无法区分大小,重组质粒进行双酶切,都出现了疑 请问在ncbi上blast的时候,需要去除pcr扩增引物序列吗?如题,在blast的时候是否要保留当时做dna扩增时的pcr引物序列.……以前做的一个系列是通过提取重组质粒测序,不去引物的,但是现在做的内 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 为什么扩大培养质粒要转到感受态细胞内而不可以直接用PCR扩增? 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 为什么每次做转化后菌落PCR有带,但是提质粒后就P不出. DNA,质粒的琼脂糖凝胶电泳及PCR结果图分析这是DNA、质粒的跑胶图这是PCR扩增的图请分析以上红线圈出来的带,迫切需要,谢谢大家了上图跑胶的第一个是质粒,第二个是DNA,可以随便找一条带 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同,通用引物和自身引物开始都能得 什么是lamda DNA?和质粒DNA有什么区别?pcr的聚合酶说可以扩增8kb的lamda DNA,没说质粒DNA.那我要pcr质粒的一个片段可以扩增多大的片段? 挑克隆鉴定时PCR有目的条带但是酶切没有做分子克隆时,铺板长出很多菌落,于是挑克隆鉴定.PCR扩增目的基因有目的条带,但是酶切重组质粒又只有一条带,酶切时间已经延长至过夜了.挑了好多 重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析