测抑制剂IC50,酶浓度怎么确定好多年前学过生化,全忘了,现在要做一个酶抑制剂得IC50我想知道IC50是不是应该随着酶浓度得变化有所不同,酶浓度应该怎么确定.如果文献上有该化合物得ic50,是不

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 03:21:11
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测抑制剂IC50,酶浓度怎么确定
好多年前学过生化,全忘了,现在要做一个酶抑制剂得IC50
我想知道IC50是不是应该随着酶浓度得变化有所不同,酶浓度应该怎么确定.如果文献上有该化合物得ic50,是不是必须完全按照他得条件才能重复出来

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如果只是IC50,一个底物浓度就够了.但是IC50会随底物浓度的变化而变化,所以你要指定一个底物的浓度,发表IC50的时候要注明你底物的浓度.这个浓度如果没有任何依据的随意指定一个,感觉上就会不专业.如果你已经有其它人关于这个酶和其它抑制剂的资料(并且上面详细注明了所用的酶和底物的浓度,还有对底物的Km),你当然可以省事的在其它人的底物浓度下测你的IC50.不过如果你没有详细的相关资料或者不很肯定查到的相关数据,最好是先自己做一下这个酶的动力学曲线.具体怎么做动力学找本书上就有了.简单的就是根据相关资料(新的酶就要看自己的感觉了)设计几个底物浓度,然后调整加的酶的浓度使得所有速度曲线在引发后的几分钟都是线性的,而且前几分钟消耗的底物量一定不要超过底物总浓度的10%.底物的浓度你要高高低低地试几次,然后估算出Km的大致值(加许多底物让酶饱和,这个时候测出的速度应该是Vmax,Km就是使得速度为Vmax一半的时候的底物浓度).然后你设计10~15个底物浓度点上及5倍Km,下及1/5Km,注意Km附近点要密集些因为正是曲线的拐弯处.情况好的话你就会拿到那个酶的Michaelis-Menten曲线(X轴底物浓度Y轴速度),处理后得到Km和Kcat.我觉得最后指定的测IC50的底物浓度要么是Km,要么是3xKm或5xKm(饱和).
当然如果你有决心的话,最好是做个关于抑制剂的全动力学以得出Ki.具体的方法 就是选5~8个底物浓度点,然后在每个底物浓度下测4~6个抑制剂浓度的反应速度,我一般是为保准确每个数据点重复2~3次,工作量不小,但是Ki不受其它因素影响,直接表征抑制剂对酶的结合能力,是适合发表的正式数据

测抑制剂IC50,酶浓度怎么确定好多年前学过生化,全忘了,现在要做一个酶抑制剂得IC50我想知道IC50是不是应该随着酶浓度得变化有所不同,酶浓度应该怎么确定.如果文献上有该化合物得ic50,是不 做细胞传导通路的实验,抑制剂说明说提供的IC50值有什么参考意义?文献上有提供抑制剂的使用浓度,但是我还想知道说明书上的IC50的意义.是不是可以根据其IC50来设置其附近的多个抑制剂浓度 origin怎么算ic50(半抑制浓度)?origin8.0怎么算ic50(半抑制浓度)? 设计测量酶抑制剂IC50的实验没有太多生化基础,想设计一个已知对某酶有抑制作用的药物的抑制效果的实验.想比较几个药物的抑制效果大小.IC50,半数抑制浓度常数是很好的一个参数.我设想用 ic50怎么计算 怎么通过几组实验计算IC50(半数抑制浓度)? 怎么计算细胞半数抑制率IC50怎么用Karber公式计算其半数抑制浓度啊?谢谢大家. 抑制剂IC50值的大小,主要反映的是那些性质? 根据浓度药效试验点,如何求IC50 的95%置信区间?注意,不是求IC50. 关于半抑制浓度IC50的计算问题假如药物浓度为250、500、1000、2000、4000ug/ml,其对应的细胞抑制率分别为28.16±3.17、48.20±4.16、65.21±4.02、73.38±1.76、89.16±2.26(%),求他的半抑制浓度IC50,怎么求?希 HPLC测药物含量时怎么确定进样浓度? 什么是酶的抑制剂 请问用origin求IC50怎么求?曲线 请问用origin求IC50怎么求?曲线 对于一个酶促反应,想要提高其速率,是 底物浓度、酶浓度、温度、PH、抑制剂、激活剂 生物化学糖代谢这章的各种代谢中限速酶的别构激活剂和抑制剂怎么背啊?好多,而且容易记混淆.求各位犀利方法 酶抑制剂药物有哪些? 影响酶促反应的因素有 A.温度、pH值 B.作用物浓度 C.激动剂 D.抑制剂和变性剂 E.酶本身浓度