DDRT-PCR该用多大电泳槽我要做植物mRNA差异显示反转录了,实验室以前没人做过,要新配电泳槽,就是不知道大概该买多大规格的.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 17:05:42
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DDRT-PCR该用多大电泳槽
我要做植物mRNA差异显示反转录了,实验室以前没人做过,要新配电泳槽,就是不知道大概该买多大规格的.

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15*15 或 15*20的水平槽都可以.

传统mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)是根据绝大多数真核细胞mRNA3'端具有的多聚腺苷酸尾(polyA)结构,因此可用含oligo(dT)的寡聚核苷酸为引物将不同的mRNA反转录成cDNA。该方法的创始人Liang P和Pardee A根据Poly A序列起点前2个碱基除AA外只有12种可能性的特征,设计合成了12种下游引物,称3′-锚定引物,其通式为5'-T11MN;同时为扩增出polyA上游500bp以内所有可能性的mRNA序列,在5′端又设计了20种10bp长的随机引物。这样构成的引物对进行PCR扩增能产生出20000条左右的DNA条带,其中每一条都代表一种特定mRNA种,这一数字大体涵盖了在一定发育阶段某种细胞类型中所表达的全部mRNA。将差别表达条带中的DNA回收,扩增至所需含量,进行Southernblot或Northernblot或直接测序,从而对差异条带鉴定分析,以便最终获得差异表达的目的基因。

DDRT-PCR该用多大电泳槽我要做植物mRNA差异显示反转录了,实验室以前没人做过,要新配电泳槽,就是不知道大概该买多大规格的. DDRT-PCR(differential display reverse transcription PCR)是什么就? 做SSR分子标记,需要用多大的电泳仪啊?我想做小麦SSR标记.不知道用什么样的电泳槽,多大的可以. Tris (三羟甲基氨基甲烷)有没有毒性?毒性有多大?做PCR是我要用的缓冲液 DDRT-PCR的随机引物是怎么设计的?没做过,不太懂这个,文献都只说随机引物,没说这个随机引物是怎么生成的?看的很困惑你这说的是锚定引物啊,不是随机引物呢,我晕了,那什么是锚定引物呢 PCR产物用什么方法纯化我要做RFLP,PCR后要做酶切,请问用什么方法纯化PCR产物比较好呢? ABI 7300 real-time PCR 仪器本人做PCR,用的PCR是7300的.在新建文件夹里下拉菜单里有以下选项Allelic discriminationBackgroundDissociationIsothermalPlus/minusPure spectraStandard curve (absolute quantitation)我要用7300做相对 求半定量PCR的详细步骤 要详细到每一步喔我要用养的细胞做PCR看几个基因的表达 用的是半定量PCR 比如说A基因 那个公司的高保真taq酶比较好用?我要做长距离PCR,然后标记做FIsh用. 菌落PCR 和 菌液PCR 用英文该怎么说? 我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?转同样的基因,在转基因烟草的PCR鉴定时,能P出目的条带,而且我用的是相同的条件来做我的却得不到结果.会不会和物种有 CTAB提取植物病原真菌的DNA用CTAB法提取植物病原真菌的DNA,然后通过PCR扩增做病原的多态性.请问:在提取DNA过程中,有什么要特别注意的问题. 【求助】为什么做PCR要做β 【求助】为什么做PCR要做β 我提取得到植物的DNA和几种真菌的DNA混合,植物对我没用,我想知道我提到的真菌是哪些,该怎么办啊本来想的是用真菌通用引物ITS1和4对其跑PCR,然后扩增出真菌DNA混合而植物的扩不出来,接着来 实时荧光定量PCR后反应体系出现蒸发,用的是ABI 7500我做实时荧光定量PCR,有两个问题要解决:1.PCR之后发现反应体系减少了,可能是因为蒸发了,但是我在PCR之前使劲盖紧盖子了,为什么还会减少. PCR试剂盒会选择PCR仪么我听说不同厂家的PCR试剂用不同的PCR仪来做结果会有差异.比如,达安基因的PCR试剂用ABI的PCR仪器做效果会比较好,而用ROCHE的PCR仪来做严重的时候会出现漏检现象.然而之 我想做细菌pcr后做dgge,我该用什么引物我现在想用引物对f341 和r518 我不知道怎么在上游引物中加GC夹子 GC夹子的序列