紫外分光光度法的原理是什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 13:13:04
紫外分光光度法的原理是什么?
紫外分光光度法的原理是什么?
紫外分光光度法的原理是什么?
紫外--可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法.操作简单、准确度高、重现性好.波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大.分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量.
基本原理: 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯 - 比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,A = ECL 式中 A 为吸收度 ; E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值; C 为溶液 浓度; L 为液层厚度。紫外 - 可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。其主要特点为:灵敏度高,可达 10 -4 g/ml ~10 -7 g/ml ;准确度高,相对误差为 2 % ~5 %。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯 - 比尔定律,均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。
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