Leathen培养基和LB培养基的成分,还有它们都分别是什么菌株生长的培养基

Leathen培养基和LB培养基的成分,还有它们都分别是什么菌株生长的培养基
Leathen培养基和LB培养基的成分,还有它们都分别是什么菌株生长的培养基

Leathen培养基和LB培养基的成分,还有它们都分别是什么菌株生长的培养基

1、 LB Medium (LB 培养基)  

Yeast extact (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 10g  

NaCl 10g Agar (琼脂) 1-2%  

Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.0  

适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌） 

2、Leathen培养基用于氧化亚铁硫杆菌的培养（成分见图上）

Leathen培养基
(NH4)2SO4 0.15g
K2HPO4 0.05g
KCl 0.05g
Ca(NO3)2 0.01g
MgSO47H2O 0.05g
蒸馏水 1000mL
FeSO4 7H2O 10%(W/V) 溶液 10mL pH 2.0
用于培养氧化亚铁硫杆菌

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Leathen培养基
(NH4)2SO4 0.15g
K2HPO4 0.05g
KCl 0.05g
Ca(NO3)2 0.01g
MgSO47H2O 0.05g
蒸馏水 1000mL
FeSO4 7H2O 10%(W/V) 溶液 10mL pH 2.0
用于培养氧化亚铁硫杆菌
另外还可以用氧化亚铁硫杆菌培养基及9K培养基来培养氧化亚铁硫杆菌
Thiobacillus Ferrooxidans Medium (氧化亚铁硫杆菌培养基)
(NH4)2SO4 0.15g KH2PO 40.05g
KCl 0.05g MgSO4.7H2O 0.5g
Ca(NO3)2.4H2O 0.01g FeSO4.7H2O 50g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 2.0
9K培养基
(NH4)2SO4 3.0g
KCl 0.1g
MgSO4.7H2O 0.5g
K2HPO4 0.5g
Ca(NO3)2 0.01g
蒸馏水 700mL
FeSO4.7H2O 14.7%(W/V)溶液 300mL pH 2.0
还有
9K,Leathen培养基由于有易被氧化的FeSO4?7H2O，一旦温度超过50℃，其中的Fe2+就会自发地快速氧化，并生成硫酸高铁、水合硫酸铁及黄钾铁钒沉淀。解决的办法有：
（1）调节培养基的pH值至1.5。在配制上述两种培养基时，pH值是一个很重要的考虑因素。pH值高则培养基经高温灭菌后，会在瓶底生成沉淀，而使溶液浑浊；实验表明，在pH值低的溶液中，培养基的各成分溶解度大些。
（2）减少铁盐及磷酸盐的用量并补充少量的酵母膏。调整后的低磷酸盐培养基组成如下（g/L）：K2HPO4 0.4,MgSO47H2O 0.4、(NH4)2SO4 0.4、FeSO4?7H2O 27.8、酵母膏0.2（也可用谷胱苷肽 0.1或半胱氨酸0.1）；pH=1.5。
（3）将FeSO4?7H2O溶液单独过滤灭菌，再与用高温灭菌的培养基中的其他无机盐溶液混合。这种方法得到的培养基Fe2+被氧化成Fe3+的量少，培养基为浅绿色澄清溶液。
在液体培养基中加入1%~2%琼脂或5%~12%明胶作凝固剂，就可制成遇热可融化、冷却后则凝固的固体培养基。固体培养基主要用于菌种的分离、菌种保藏、鉴定等。氧化亚铁硫杆菌
（Thiobacillus ferrooxidans）菌种在琼脂培养基上生长很弱，难以形成菌落，为菌种分离及遗传操作带来了很大困难。出现这种情况的主要原因是琼脂在酸性条件下生成的水解产物对菌体有毒害作用。针对这个问题可采用多种方法克服：
（1）适当地降低琼脂浓度，小于2%；
（2）控制pH值在3.0左右，pH值太低，琼脂粉因水解而不凝固；pH值太高，细菌的生长缓慢；
（3）适当降低FeSO4.7H2O和磷酸盐的浓度，分别不宜超过22.2g/L和0.05g/L；
（4）选用质量较好的琼脂，如琼脂糖
除此之外还可采用ISP固体培养基。
ISP固体培养基的配制：
溶液A，300 mL蒸馏水中加入FeSO4?7H2O，配成浓度33.4%的溶液；用6MH2SO4调pH值至2.5，搅拌至几乎无色，用细菌滤膜灭菌后，置于室温中。
溶液B，550mL 蒸馏水中加入(NH4)2SO4 6.0g、KCl 0.2g、MgSO4•7H2O 1.0g、Ca(NO3)2 0.02g，调pH值至3.0，121℃，1.21atm，灭菌15min。
溶液C，纯化的琼脂7.0g加到150mL水中，浸泡15min，在1升锥形瓶中升温至121℃，1.21atm灭菌5min。B和C从高压釜中取出，在空气中冷却5 min，然后将B、C混合，将A加入上述混合物，并搅匀。三者混合物倒于平板上，深度约为培养皿的高度的一半。

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