小提质粒酶切出来了,为什么大提之后就切不出来了呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 03:27:35
小提质粒酶切出来了,为什么大提之后就切不出来了呢?

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小提质粒酶切出来了,为什么大提之后就切不出来了呢?

小提质粒酶切出来了,为什么大提之后就切不出来了呢?
主要是你在大提时,一次放大的倍数太大,导致细菌丢失质粒的比例过多,质粒提取的质与量明显下降,杂质太多,所以就切不出来,你可以试着将DNA加入量减少,看一下能否行的通.如本来加入500ng/10ul反应体系的,加入250ng/10ul试一下.

先看看电泳图谱,比较下是不是结构变了,变成超螺旋了?
大提后要不是结构变了,要不是最后的溶液中有杂质,不利于内切酶工作。

小提质粒酶切出来了,为什么大提之后就切不出来了呢? 双酶切连接后转化,长出了菌落,但提质粒跑电泳,分子量比目的质粒大很多,为什么 大提质粒酶切检测,无论以哪种方式酶切跑胶时总多出条2500kb的带是为什么? 天根质粒小提试剂盒提大肠杆菌质粒,浓度偏低的原因?最近在做载体构建,好不容易检测到了阳性克隆,准备摇菌提质粒进行酶切鉴定,进而测序.摇菌12-16小时后 用天根小提质粒试剂盒提取质粒, 为什么线性化质粒跑的快?对一个11kb的大载体做了单酶切,切完后线性化的质粒比未切的质粒跑的还快,为什么?线性的不是比环状的慢吗? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次 转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒? 为什么下雨之后蚯蚓为出来?而且出来的都是那种大的蚯蚓,很少见小蚯蚓出来,这是什么原因? 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 博凌科为 的 无内毒素质粒大提试剂盒 提质粒的目的是什么?酶切的目的是什么? 是RNA剪接的问题吗?做转染或者感染的同仁们,想请教下你们有碰到过这样的问题吗,就是转完基因后,RT-PCR检测发现目的片段要比先前转进去的质粒DNA片段小,提了细胞的DNA出来跑PCR,片段和质粒 我做质粒酶切实验,需要大量质粒.从含抗生素的平板中挑菌后接种,然后在试管里面培养过夜进行小提质粒.我做质粒酶切实验,需要大量质粒。从含抗生素的平板中挑菌后接种,然后在试管里 为什么上初中之后,脸变得一边大一边小, qiagen 试剂盒提质粒为什么效果还是比较差? 提质粒用的大肠杆菌为什么要培养2代 [PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带?