不同细胞siRNA转染效率的检测问题(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 14:58:34
不同细胞siRNA转染效率的检测问题(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time  PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20

不同细胞siRNA转染效率的检测问题(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20
不同细胞siRNA转染效率的检测问题
(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20-30%, 那抑制20-30%也就不少了.因此想请教一下,一般不同细胞通常转染效率是多少?我用的是MT4(悬浮)、CEM(悬浮)、HepG2(贴壁)听说悬浮 细胞转染效率要低,原代更低,贴壁好一些,是否如此?(2)针对GFP的siRNA是不是在设计siRNA时就将GFP的表达序列设计进去?

不同细胞siRNA转染效率的检测问题(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20
博凌科为1.通常情况下悬浮细胞转染效率较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低.HepG2的DNA转染效率大概有50%,siRNA暂时没做过.如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率.如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下转染DNA好的话,转染siRNA也不会差的.个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率.2.不是的.针对GFP的siRNA和我们通常用的化学合成的siRNA一样,只不过是针对GFP基因的.

不同细胞siRNA转染效率的检测问题(1)最近在做RNAi,用的siRNA,然后Real-Time PCR,发现抑制率仅20-30%左右,与说明书说的70-90%相去甚远,咨询相关人员后,认为可能是转染效率的问题,如果转染效率仅有20 siRNA转染细胞的方法 如何检测电穿孔转染siRNA的转染率? 我想做siRNA转染后细胞生长曲线的变化,那么用lipo2000转染应该是稳定转染还是瞬时转染? 质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗? 如何鉴定细胞的转染效率? 流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?您好我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,步骤是不是这样的:1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形 如何检测脂质体转染效率 用流式细胞仪分析细胞转染效率的原理是什么 思考题,在哺乳动物细胞转染实验中为提高转染效率需要注意哪些问题 在哺乳动物细胞转染实验中为提高转染效率需要注意哪些问题 在哺乳动物细胞转染实验中味提高转染效率需要注意哪些问题 慢病毒转染系统和逆转录病毒转染系统在转染T细胞的过程中操作有什么不同?有什么注意事项啊?为什么我做的转染效率连5%都达不到? siRNA转染请问,用lip2000转染化学合成的siRNA,说明书上推荐的用量,其中siRNA终浓度为33nMoil/L转染步骤为:siRNA 1ul(20pM) + 培养基 50uL lip2000 1uL + 培养基 50uL那么要是siRNA终浓度为50nMol/L时,siRNA 为1.25ul siRNA可以直接转染细胞吗?还是非得连接载体再能转染? 真核质粒转染与脂质体转染有什么不同?真核质粒转染与脂质体转染有什么不同经常看到siRNA的真核质粒的构建以及脂质体的转染,但不知二者有什么不同?因为目的基因的siRNA可直接通过脂质体 师姐,找到你太好了,我也是做SiRNA转染进HepG2细胞,我在上海吉凯公司订制的SiRNA(沉默ZAG基因),想问问你,把SiRNA转染进HepG2细胞有哪些方法?你是用的哪种方法?你觉得哪种方法最好呢? 想请教您关于流式的问题,用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转化效率,GFP验证工作效率用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转染效率,GFP验证核酸酶工作效率(即GFP本来不发光,只