为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小PCR引物设计时一般要求引物的长度和GC比各是多少？这种要求的基本理论依据是什么

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 08:49:56

为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小PCR引物设计时一般要求引物的长度和GC比各是多少？这种要求的基本理论依据是什么
为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小
PCR引物设计时一般要求引物的长度和GC比各是多少？这种要求的基本理论依据是什么

为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小PCR引物设计时一般要求引物的长度和GC比各是多少？这种要求的基本理论依据是什么
因为GC之间有三个氢键,而AT之间只有两个氢键,因此GC含量越高,要打开氢键的能量就要求越大,即退火温度越高.PCR退火有的是根据GC含量估算Tm
更详细说明次料：
PCR引物应该保持合理的GC含量.含有50％的G+C的20个碱基的寡核苷酸链的Tm值大概在56～62℃范围内,这可为有效退火提供足够热度.一对引物的GC含量和Tm值应该协调.协调性差的引物对的效率和特异性都较差,因为降低了Tm值导致特异性的丧失.这种情况下引物Tm值越高,其错误引发的机率也越大.若采用太高的退火温度,Tm值低的引物对可能完全不发挥作用.在从一批在特定序列范围内已合成好的寡核苷酸中选择一对新的引物时,这种GC含量和Tm值的协调非常关键.一般来说,一对引物的Tm值相差尽量不超过2～3摄氏度,同时引物和产物的Tm值也不要相差太大,20摄氏度范围内较好.

合成片段需要模板，模板多大，被合成的片段多大
引物只是用来让pcr开头的

撒旦阿斯打死打伤的萨大声

1这个反应需要设计两端引物两端引物之间就是需要扩增的部分。故而决定其长度。
2引物设计要求长度一般在15-30个碱基，长度在18-27bp，不大于38bP。过长会使延伸温度高于74度，不适合Taq酶反应。GC碱基含量40一60%，过高或低都不利于反应。影响Tm，启动温度。
希望能帮到你!...

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1这个反应需要设计两端引物两端引物之间就是需要扩增的部分。故而决定其长度。
2引物设计要求长度一般在15-30个碱基，长度在18-27bp，不大于38bP。过长会使延伸温度高于74度，不适合Taq酶反应。GC碱基含量40一60%，过高或低都不利于反应。影响Tm，启动温度。
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为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小PCR引物设计时一般要求引物的长度和GC比各是多少？这种要求的基本理论依据是什么 pcr 为什么要同时用上下游引物可以只用上游,或者下游引物吗?是不是同时用上下游,这样才能P出想要的大小片段.如果只用上游或者下游,会P的过大或者过小 PCR扩增DNA片段为什么第三次才会出现引物对的配对关于PCR引物问题请问为什么PCR后扩增的片段都是相同的长度?引物的延伸到的什么时候会停止呢? PCR引物怎么合成?DNA的PCR扩增技术中的引物. 荧光定量PCR 溶解曲线与什么有关与产物片段大小有关还是与引物的溶解温度有关为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 请给我解释一下RT-PCR的图,上面引物是GUS,下面引物是GAPDH,右边数第二个孔是阳性对照,左边第一个是marker 引物名称引物序列扩增片段大小怎样通过已知基因序列和引物序列测算PCR产物大小新买的载体,其基因序列已有,引物序列也有,通过什么样的方法测定出PCR后的片段大小?用什么软件? 怎样通过已知基因序列和引物序列测算PCR产物大小新买的载体,其基因序列已有,引物序列也有,通过什么样的方法测定出PCR后的片段大小?用什么软件? 请问PCR技术中作为引物的可以是RNA吗?如果可以,那么DNA和RNA作引物合成出来的子链有何不同吗? DNA复制中引物RNA的机制是什么?PCR中为什么有了DNA引物就可以往下进行了? PCR为什么能扩增特意的基因片段呢虽然有引物,但是PCR延伸的时候不是把不要的基因也复制下来了吗,不懂 PCR引物的问题PCR时,单引物可以扩增模板吗? 用自己合成的引物送到测序公司进行细菌基因组测序对一种细菌的基因组进行了突变处理,但是不知道是否突变成功,如果用自己的引物去扩PCR,如果成功的话是可以扩出4000bp的片段的,可是不知 pcr引物的作用 pcr扩增目的基因,为什么要先合成引物,直接用游离的核苷酸去聚合不可以吗?不用引物不可以吗,放上游离的CTAG,自由组合不行吗?为什么?那引物和母链结合后，在聚合酶的作用下复制，复制时为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗?