我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带!这是为神马?只连这个穿梭载体就已经连了两个月了,我快崩溃了!

我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带!这是为神马?只连这个穿梭载体就已经连了两个月了,我快崩溃了! 实验室碱基测序一半怎么测的?我论文里面有一句话“通过电泳初步了解载体构建情况后,再对构建好的载体pPIC-P-T-cel7A进行碱基测序,测定表达框cbh1启动子到终止子间的序列情况.通过DNAssist.exe 构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和已经预先双酶切的目的载体连接,那么?先前的目的基因为什么不直接和目的载体相连呢?为什 哪里做质粒和载体构建服务好? 有哪家公司做质粒和载体构建服务好? 关于真核载体的构建真核载体的构建的要点和基本原则是什么表达载体 为什么构建克隆载体不需T4连接酶为什么PCR扩增出的DNA片段和克隆载体pMD 18-T连接不需T4连接酶,而和表达载体连接就需要T4连接酶. 怎么构建克隆载体和表达载体? 为什么将构建好的载体,电转入嗜热链球菌后,平板上长出了单克隆,可是却提不出质粒? 在构建表达载体时,会出现哪些意外连接?因此基因工程必然要进行什么环节?生物选修部分的内容现代生物科技专题 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? 基因重组中碱基突变的原因?先用T载体将目的基因进行了连接,测序之后是正确的.但后用PET28a构建,测序发现丢失一个碱基,并有一个碱基突变.会有什么原因?构建中什么原因会导致突变,如何避 基因表达载体的构建 载体构建的过程rt. 大家好,我现在做细胞实验开始需要构建目的基因的过表达,不知道应该选用慢病毒载体还是腺病毒载体,标书 请问什么是穿梭质粒载体和表达质粒载体? 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶切位点,但现在将T载体进行双酶切,缺总是切不完全,只有大约1/3的载体被切开,所以200bp的条 我在构建质粒：载体大小为9kb,目的片段为3.4kb,连接产物可以用普通的热击方法转化感受态Ecoli.DH5a吗?