western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 13:53:25
western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多

western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多
western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答
刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多少的时候实验组的都以对照组为标准来比较行么?pcr产物检测的时候只有marker是不是就行,不用内参?另外还有一个疑问,免疫组化和western都是用来测蛋白,有必要对同一种蛋白两种方法都做么?

western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多
首先要明白,marker和内参不是一种东西.Marker是用来标定蛋白或者DNA大小的.内参对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物.其作用是校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性.
pcr产物检测一般marker就可以了.不用内参.
western一般全都要用.
免疫组化检测蛋白偏重于蛋白在细胞及组织中的表达分布,定量较为不精确.所以要根据你实验的目的选择实验方法.

western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多 关于western blot 内参是什么 qRT-PCR中标准曲线制作及浓度梯度问题要做qRT-PCR,但是不太清楚,1：浓度梯度是用来制作标准曲线的吗?2：是不是内参和每个目的基因都要制作各自的标准曲线?也就是说如果我要作10个基因的话 我要做荧光定量PCR,测细胞因子mRNA,要测三种因子,是否是把三种引物和内参基因引物分别加入到四个体系中 western-blot中蛋白量就等于蛋白灰度值乘以上样量除以内参灰度值?你一直在回答我关于western-blot的追问我要算A7的p38蛋白的含量,就是（A7的灰度值）5928.619*30/10349.57（A7的内参值）请问这样算出 RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin在人和动物细胞中扩增可以用同一对引物吗?正在做RT-PCR实验,所用细胞系有人肿瘤细胞和小鼠巨噬细胞,请问所用内参蛋白GAPDH和b-actin在这两种细胞系中可以用同一 定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均, 血清western blot怎样选择内参? Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 Western Blot为什么必须要用内参 RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin人和小鼠的可以用同一对引物吗?最近在做RT-PCR实验,所用细胞有人肿瘤细胞和小鼠巨噬细胞,请问内参蛋白GAPDH和b-actin在这两种细胞中扩增可以选用同一对引物吗? RT-PCR电泳照片做RT-PCR跑电泳时,只在一个孔中单独加了内参,其他孔中分别加了marker和目的基因,这样的照片发表文章时行吗?看其他人的电泳照片内参的亮度都是一样的,我就只单独加了一个内